Fenotipizzazione ed interpretazione diagnostica delle leucemie
UK NEQAS for Leucocyte Immunophenotyping - Leukaemia ImmunophenotypingProtocollo diagnostico di fenotipizzazione e interpretazione clinica, applicato ai pazienti con neoplasie ematologiche
Il programma è concepito per simulare in modo realistico l’iter diagnostico morfologico e immunofenotipico delle emopatie maligne ed è suddiviso in due sessioni:
Fenotipizzazione delle Leucemie (Prima Parte)
Obiettivi del programma: stabilire la capacità del laboratorio di caratterizzare l’immunofenotipo di una forma leucemica utilizzando citometria a flusso o immunochimica. Il programma è strutturato in modo da riprodurre l’iter diagnostico di un laboratorio clinico.
Background clinico-scientifico: la caratterizzazione immunofenotipica è un importante passaggio del percorso diagnostico delle leucemie acute linfoblastiche, mieloblastiche (ALL e AML), di alcuni linfomi, delle malattie linfoproliferative croniche e del mieloma. La citometria a flusso e l’immunochimica permettono l’identificazione e la caratterizzazione delle popolazioni cellulari anormali attraverso l’espressione di marcatori di superficie o intracellulari. L’immunofenotipizzazione delle forme leucemiche è inoltre un utile strumento nel monitoraggio dell’efficacia delle terapie.
A chi è rivolto il programma: la partecipazione a questo programma di External Quality Assessment (EQA) è raccomandata ai laboratori di primo e secondo livello che eseguono l’immunofenotipizzazione citometrica delle forme leucemiche.
I campioni di sangue intero devono essere trattati come ordinari campioni clinici, e se necessario possono venire trasferiti a laboratori locali di secondo livello per ulteriori approfondimenti. Ai partecipanti viene chiesto di allestire un appropriato pannello di marcatura sulla base di un’immagine di citomorfologia digitale, associata ad alcuni dati clinici e ai paramteri dell’emocromo forniti con la presentazione del caso. I risultati per ciascun marcatore relativi alla sola popolazione anormale identificata devono venire espressi come positivo/negativo, e questo genererà un punteggio prestazionale. Viene inoltre richiesto di definire in modo semiquantitativo l’intensità di espressione di ciascun marcatore positivo.
Tutte le comunicazioni relative al programma EQA tra il partecipante e il provider UK NEQAS di Sheffield sono effettuate in lingua inglese.
Il Programma è diretto a diverse tipologie di partecipanti:
• Laboratori di Analisi Cliniche
• Laboratori Accademici e di Ricerca
• Produttori e venditori di sistemi diagnostici in vitro (IVD)
• Laboratori Farmaceutici
Il minimo numero di partecipanti allo schema è 30, il massimo numero è 600.
Cadenza degli esercizi: il programma EQA invia da un minimo di 4 a un massimo di 6 esercizi all’anno, con un campione di sangue intero stabilizzato ciascuno, in funzione della disponibilità dei materiali biologici, derivanti da pazienti reali. I campioni si analizzano con le ordinarie tecniche di marcatura su sangue intero e lisi degli eritrociti. I campioni patologici sono diluiti. talora in modo elevato, in sangue umano normale. I campioni stabilizzati non vanno usati per produrre strisci, poiché questo processo altera in modo marcato la morfologia cellulare.
Ogni esercizio rimane aperto per un minimo di tre settimane. Gli esercizi lanciati o in chiusura nei mesi di Agosto e Dicembre sono lasciati aperti per un’ulteriore settimana. Una e-mail viene automaticamente inviata ai partecipanti che non hanno ancora inviato i risultati due giorni prima della data di chiusura, per ricordare l’imminente scadenza.
Interpretazione Diagnostica delle Leucemie (Seconda Parte)
Obiettivi del programma: stabilire la capacità dell’équipe clinica e di laboratorio di diagnosticare una forma leucemica, utilizzando un completo spettro di informazioni cliniche e biologiche. Il programma è strutturato in modo da riprodurre l’iter diagnostico di un laboratorio associato a un centro di ematologia clinica.
Questa parte del programma EQA sottopone al partecipante una varietà di casi. Ogni esercizio fornisce i seguenti dati utilizzabili per la diagnosi:
• Un immunofenotipo esteso di consenso
• Una dettagliata storia clinica
• Immagini digitali ad alta risoluzione di strisci periferici e/o di midollo, talora anche con colorazioni citochimiche
• Dati di Genetica Molecolare e di Citogenetica
I partecipanti devono utilizzare l’insieme di queste informazioni per formulare la più appropriata diagnosi conclusiva, basata sui criteri della quinta edizione 2022 della classificazione WHO.
Background clinico-scientifico: la diagnosi delle emopatie maligne richiede la combinazione di dati clinici e di laboratorio. È essenziale che l’équipe usi in modo appropriato e competente i dati forniti per formulare la diagnosi conclusiva, che ha una forte rilevanza nelle scelte terapeutiche, nella prognosi del paziente e nel monitoraggio dell’efficacia dei trattamenti.
A chi è rivolto il programma: la partecipazione a questo programma di External Quality Assessment (EQA) è raccomandata ai laboratori (équipe) o ai singoli professionisti impegnati nella routine diagnostica delle malattie di interesse oncoematologico.
Si prega di notare che i centri che si iscrivono alla Prima Parte dell’esercizio vengono automaticamente iscritti anche alla Seconda, e devono quindi completare entrambe le sezioni.
Tutte le comunicazioni relative al programma EQA tra il partecipante e il provider UK NEQAS sono effettuate in lingua inglese.
Il Programma è diretto a diverse tipologie di partecipanti:
• Laboratori di Diagnostica Clinica
• Laboratori Accademici e di Ricerca
• Produttori e venditori di sistemi diagnostici in vitro (IVD)
• Laboratori Farmaceutici
• SIngoli professionisti esperti in ematologia
Il minimo numero di partecipanti allo schema è 30, e non esiste un limite massimo.
Per questo programma non vengono inviati campioni biologici, essendo gli esercizi basati interamente su comunicazioni digitali via web. Gli esercizi sono tradizionalmente collegati al caso tipizzato nella Prima Parte, ma dal 2026 possono essere anche essere autonomi e a sé stanti, per offrire uno spettro più articolato di casi, che non è sempre facile offrire ai partecipanti come campioni biologici reali.
Cadenza degli esercizi: il programma EQA organizza da un minimo di 4 a un massimo di 6 esercizi all’anno.
Ogni esercizio rimane aperto per un minimo di tre settimane. Gli esercizi lanciati o in chiusura nei mesi di Agosto e Dicembre sono lasciati aperti per un’ ulteriore settimana. Una e-mail viene automaticamente inviata ai partecipanti che non hanno ancora inviato i risultati due giorni prima della data di chiusura, per ricordare l’imminente scadenza.
